Pureza por HPLC
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La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es el estándar del sector para medir la pureza de los péptidos. Cuando un péptido declara un porcentaje de pureza por HPLC, esa cifra debe proceder de un sistema HPLC calibrado, normalmente con una columna C18 de fase inversa y un detector UV a 214 nm o 220 nm. Cada pico del cromatograma representa una especie molecular distinta; el área bajo el pico objetivo, expresada como porcentaje del área total de picos, es la cifra de pureza. En péptidos de investigación, incluso los valores de pureza muy altos deben analizarse junto con los ensayos de lote adicionales que realmente se hayan realizado, sin tratar la pureza como prueba de identidad molecular. La longitud de onda de detección UV importa: 214 nm capta directamente la absorción del enlace peptídico y es el ajuste más universal para péptidos; 220 nm se usa a veces para reducir el ruido de la fase móvil, pero subestima la absorbancia en péptidos sin restos aromáticos. La HPLC en gradiente, que varía la composición de la fase móvil a lo largo del tiempo, separa especies muy próximas, como secuencias truncadas a las que falta un resto, variantes oxidadas o restos racemizados, que coeluirían en condiciones isocráticas. El informe completo de pureza de un certificado de análisis debe incluir el tipo de columna, la fase móvil, el programa de gradiente, el caudal, la longitud de onda de detección, el tiempo de retención del pico objetivo y una copia del propio cromatograma. Revisar todo ello es la única manera de entender qué significa una cifra de pureza declarada para el lote correspondiente. Peptra Labs registra estos parámetros en la información COA disponible para los lotes que la tienen.
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Última actualización: 4 de mayo de 2026